干细胞冻存过程中的影响因素有哪些？

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主要是细胞浓度、冷冻速率和冻存液。以较高的细胞浓度进行冻存，细胞的存活率更高，冻存速率是以1℃/min的速率进行冻存效果最佳。目前最常用的干细胞冻存液为90％胎牛血清+10％二甲基亚砜，或者50％干细胞完全培养基+40％FBS+10％DMSO。DMSO虽然对细胞的穿透力较强，可以降低细胞的冰点，减少冰晶的形成，在降温的过程中能对细胞达到保护作用。但是高浓度二甲基亚砜具有毒性，可以与细胞内蛋白质的疏水基团发生作用，导致蛋白质变性，造成细胞损伤或者失活。而且现有的冻存液由于使用动物源的血清导致细胞冻存液中参入非人员物质，会对多功能干细胞造成残留或者污染。

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